ELISA的實(shí)驗(yàn)操作所要求的條件是比較嚴(yán)格的，無(wú)論是對(duì)實(shí)驗(yàn)的硬件條件還是對(duì)實(shí)驗(yàn)的操作人員的技術(shù)要求，都是如此。今天就為大家介紹ELISA實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程中需要注意的這些檢測(cè)要點(diǎn)，供大家參考。      

1.仔細(xì)閱讀說(shuō)明書 確定試劑盒在有效期內(nèi)。

2.按說(shuō)明書確定所有試劑齊全，以及所有實(shí)驗(yàn)額外所需物品，如試管、吸頭、移液器、離心機(jī)等。

3.標(biāo)本制備要規(guī)范，每份標(biāo)本體積要按2-3個(gè)復(fù)孔以上的量制備(貯存)，盡量分裝做備份。短期內(nèi)無(wú)法實(shí)驗(yàn)者，注意低溫保存。

4.按說(shuō)明書將所用試劑平衡至室溫，配制所需試劑。

5.選擇抗體時(shí)選擇一個(gè)單抗和一個(gè)多抗進(jìn)行配對(duì);若選擇兩個(gè)單抗，必須識(shí)別不同表位的抗體;從同一家公司選擇抗體。

6.一般待測(cè)抗原標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性范圍的可通過(guò)將標(biāo)準(zhǔn)品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml到15pg/ml。可利用標(biāo)準(zhǔn)的Elsia操作流程、放大試劑盒、第三類試劑、或改變酶底物系統(tǒng)可在一定范圍內(nèi)提高靈敏度。